肿瘤干细胞转录调节,干细胞临床转化指南
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rna免疫沉淀实验
RIP(RNA Immunoprecipitation)是一种通过特异性抗体富集与目标蛋白结合的RNA分子的技术,广泛应用于研究RNA与蛋白质的相互作用。
Total RNA样品检测 在进行MeRIP-seq实验前,需要对Total RNA样品进行严格的检测,以确保其质量和数量满足实验要求。检测主要包括以下三个方面:琼脂糖凝胶电泳分析:用于检测RNA的降解程度以及是否存在污染。合格的RNA样品应具有明显的18S或28S主带,且条带清晰。
RNA样品中加入等体积的frag buffer,吹打混匀。94℃孵育6 min。用酚氯仿回收RNA。检测RNA片段大小:配制1%琼脂糖凝胶,检测RNA片段大小。取2 μL RNA样品作为Input样品,-80℃保存备用。分别取20 μL RNA样品作为m6A组和IGG组。
TGF-β对癌症免疫应答的调控
1、髓系细胞极化调控:TGF-β影响巨噬细胞极化,抑制M1样促炎表型,促进M2样抗炎表型,从而抑制炎症反应并促进肿瘤免疫逃逸。
2、抑制DC细胞激活:TGFβ可以抑制树突状细胞的成熟和激活,从而影响抗原呈递和T细胞的激活。影响T细胞分化:TGFβ对T细胞的分化具有重要影响,可以调控THTHTH1Treg和CD8reg等亚群的平衡。调控免疫抑制受体:如PD1等抑制受体的表达受TGFβ的调控,进而影响T细胞的免疫应
3、TGF-β与肿瘤细胞紧密相关,其信号可诱导EMT,增强细胞迁移和侵袭能力,同时改变免疫细胞的功能,抑制T细胞和B细胞的激活。在免疫肿瘤学视角下,TGF-β影响免疫系统的抗癌和促癌反应,对适应性免疫如T细胞和B细胞的分化和功能调控显著。
4、在肿瘤内部,TGF-β通过调控CTL(细胞毒性T细胞)和Th细胞的功能,以及影响血管生成和巨噬细胞极化,展现了其深远的影响。在先天免疫系统中,如胸腺和骨髓,TGF-β更是主导了iNKT细胞和ILC(固有淋巴细胞)的分化。
5、抑制增殖与细胞因子分泌:TGF-β抑制CD4+TH细胞的增殖,并减少TNF和IFNγ的表达,削弱其支持细胞毒性T细胞和巨噬细胞杀伤肿瘤的能力。诱导分化偏移:在IL-IL-6和IL-1β存在时,TGF-β促使CD4+TH1细胞向TH2和TH17细胞分化,改变免疫应答方向。
6、TGF-β是先天免疫和适应性免疫的关键调节剂,作为免疫耐受的一般执行者和炎症的抑制者。这些功能是TGF-β生物学的基础。TGF-β活性过量会导致免疫抑制,从而支持肿瘤发生;而缺乏则会导致炎症,从而导致纤维化。Tgfb1基因敲除小鼠在生命早期死于多器官炎症。
杰特宁Nature系列综述:中山大学黄蓬团队阐述靶向肿瘤活性氧(ROS)的原理与策略...
中山大学黄蓬团队在《Nature Reviews Drug Discovery》发表综述,系统阐述了靶向肿瘤活性氧(ROS)的原理与策略,总结了近十多年ROS领域在信号通路、肿瘤代谢、免疫、相分离、干细胞及细胞命运等方面的重大进展,并提出了靶向ROS的氧化还原调节治疗策略及未来研究方向。
中山大学黄蓬团队在Nature系列综述中阐述了靶向肿瘤活性氧的原理与策略,主要包括以下几点:ROS在癌症中的关键作用:ROS通过调节转录因子和表观遗传修饰,影响肿瘤细胞的代谢途径。高浓度的ROS在肿瘤中引发恶性循环,影响线粒体功能并激活炎症反应,从而影响肿瘤微环境和免疫功能。
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