细胞外泌体收集之前用什么样的培养液
一般培养24-48h后细胞即可分离外泌体，在特殊情况下，如在培养基中添加特殊的化学物质，培养15-60min即可收集。因细胞死亡会分泌小体，所以在研究外泌体时细胞的死亡率一定要控制 5% 之内。未经处理的FBS中含有大量的外源外泌体，所以细胞培养一定要用经过处理不含外泌体的FBS。
外泌体含有丰富的生物活性物质，如蛋白质、核酸和脂质等。以下是一种使用超速离心法提取外泌体的步骤：材料 细胞培养上清液 离心管 0.22 μm 的滤膜（例如Millipore）超速离心机（例如Beckman Coulter）步骤 将细胞培养上清液通过 0.22 μm 滤膜过滤，以去除杂质和细胞碎片。
就是在收集准备提取外泌体的条件培养基或者血清时，一定要提前做到低速离心和普通高速离心这一步，尤其是为了做透射电镜或者蛋白免疫印迹实验而提取的外泌体 ，一定要注意这一点。尽管过程比较费时，但是能生产出有用的结果才是更重要的。
传代至3代，并鉴定细胞纯度为95％以上，作为种子细胞；脂肪间充质干细胞工作细胞库的建立：将步骤2中的种子细胞计数并无血清培养基悬浮，待培养瓶中细胞融合到80％-90％，将细胞进行消化、传代至3-6代；提取步骤3所获细胞的外泌体，加入生理盐水或者微载体定容，制成adsc外泌体制剂。
造血干细胞移植采集外周血干细胞需要多少血?怎么保存啊?
1、中山大学附属第三医院血液内科刘加军：！您咨询的是关于外周血造血干细胞的采集。
2、目前，多采用外周血造血干细胞移植，主要从外周血采集，如同献血一样。一般抽取50ml左右。分离造血干细胞后，一般情况下，血液原有功能不会受到影响。
3、自体外周血造血干细胞动员可通过化疗药物、生长因子或联合应用，如G-CSF或GM-CSF，采集后冷冻保存。异基因采集则需供者单独用G-CSF动员，采集后尽快回输或低温保存。
4、以检查重要器官功能是否存在缺陷，以及是否患有感染性疾病。当前，大部分供者在移植过程中需要提供骨髓和外周血干细胞。因此，供者在采集干细胞前两周需要自体备血，一般建议备血量为400-800毫升，以备不时之需。这是一项对供者身体状况的严格要求，以确保移植过程的安全和成功。
5、而且，由于技术的进步，现在运用造血干细胞“动员”技术，只需采集分离约50至200毫升外周血即可得到足够数量的造血干细胞。采集足够数量的造血干细胞后，血液可回输到捐献者体内。通过干细胞移植过程可以治疗多种疾病，而且效果明显。
想问一下干细胞治疗的费用能用多少?
1、一些医疗机构或公司提供的干细胞抗衰服务可能需要几十万甚至上百万的费用，但成本并不一定只有百元。这取决于多种因素，如干细胞的来源、制备过程、注射技术、治疗剂量、治疗次数等。总的来说，干细胞抗衰是一种新兴的抗衰老治疗方法，具有一定的疗效和潜力。
2、你好，一般来说这个表示的是单位，一般来说10的8次方或者10的7次方是一个很大的单位，10的8次方比10的7次方更大一些。
3、费用要根据病人的情况而定，比如：轻度进行2次移植、中度进行3次移植。每次移植费用为9600元，两次移植另加住院、检测、用药、治疗全部费用约为4万元左右，目前绝大多数人进行2次即可、干细胞移植每次移植费用为3800元，四次是一个疗程，总的费用2万元左右。
北京航天中心医院内分泌科真的能根治糖尿病吗
1、航天中心医院血液内分泌科在王意忠主任带领下，吸取自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病的经验，探索出一套包括干细胞动员、干细胞采集、干细胞植入的新方案，并成功应用于临床。
2、糖尿病目前没有根治的可能。不幸得了糖尿病并不可怕，可怕的是对该病的病理，病因，和自身的病情都不了解。 千万别被这些所谓“医疗界尖端科技”给蒙了！如果说那个王意忠能治好糖尿病，他应该不在北京航天中心医院，应该是在火星航天中心医院。
3、糖尿病目前没有根治的可能。不幸得了糖尿病并不可怕，可怕的是对该病的病理，病因，和自身的病情都不了解。千万别被这些所谓“医疗界尖端科技”给蒙了！如果说那个王意忠能治好糖尿病，他应该不在北京航天中心医院，应该是在火星航天中心医院。
4、我的一个病人做过，大概是10万元，不过好像做完了没什么效果，还在打胰岛素每天，而且剂量和之前没什么变化。
5、——记航天中心医院血液内分泌科成功完成第一例自体外周血干细胞移植治疗糖尿病 目前糖尿病患病率迅速增长，但除控制症状外尚无根治性疗法。胰岛移植和胰腺移植由于其固有的目前无法克服的两大问题，既供体不足和免疫排斥，使其不能广泛应用。近年来，干细胞研究的进展为我们提供了一条新的途径。
6、谁也不知道，或许只有等时间来回答了。糖尿病的发生是因为内分泌紊乱，新陈代谢失调，免疫失控造成的。治病就应该从根本上进行治疗。现阶段最好的糖尿病治疗手段还是中西医结合。西药降糖，中药治本，标本兼治，才能从根本上治疗糖尿病。
造血干细胞移植的三个必要条件是怎样?
1、③是要有一定量的造血干细胞数。这点不难理解，既然作为种子细胞，就要到适合于它的新的“土壤”环境中去生根、发芽、开花和结果，就不会是一帆风顺，其过程会有损失，没有一定数量是不行的。这些主要是对异基因造血干细胞移植而言。
2、感染：患者接受造血干细胞移植后，由于免疫功能的抑制，发生感染的机会明显增加，发生率50%～80%。感染病变可能发生在身体的任何部位，可能来自移植操作的并发症、潜在的感染病原体激活、环境中接触的新病原体。引起感染的病原体包括细菌、真菌、病毒、寄生虫等。
3、患者和供者达到移植的必备条件，其中供者要经过体检。患者入仓进行预处理。在采集干细胞前几天，对供者施行细胞动员。同时对患者采取放化疗手段完成清骨髓。采集供者的造血干细胞，及时给患者回输。患者在仓内遭罪吧！供者可以当日出院（未住院的提不到这个），进行数天的休养即可。
4、造血干细胞的移植：（1）适应证：allo－HSCT适应证较广泛，可以治疗恶性血液病、非恶性难治性血液病、严重遗传性及代谢性疾病，而auto－HSCT主要治疗恶性血液病、某些实体瘤、严重自身免疫性疾病。
5、造血干细胞移植的三个必要条件： 一是移植前的预处理。这是为了使受者能够接受外来的造血干细胞和减少本身肿瘤细胞的负荷采取的措施，经典的方案是环磷酰胺60毫克/公斤体重服3日加上8～12戈瑞的一次或分次的全身照射。这种方案对病人损伤较大，多用于原来身体较好、年龄较轻、病程较短、主要脏器功能良好的患者。
杰特宁
神经干细胞移植的移植途径
移植神经干细胞的方法有三种方法进行神经干细胞移植：腰椎穿刺蛛网膜下腔注射。该方法具有创伤小、时间短、治疗范围广泛等优点；头部钻孔注射。具体方法为在头顶颅骨上钻一到两个小孔，然后将神经干细胞移植到脑组织中。
下面就各种移植途径的应用方法和主要特点概述如下。 立体定向脑内注射移植是目前动物实验和临床研究采用最多的干细胞移植方法。该技术是应用CT/MRI扫描定位后，图像象输入计算机，利用计算机规划移植靶点、手术路径，局部麻醉后，颅骨钻孔，插入探针，微量泵泵入神经干细胞。
而获取神经干细胞只有三个途径，一种是通过胚胎提取，也就是从流产的胎儿身上抽取获得干细胞；二是通过克隆，通过抽取动物的细胞注入卵母细胞，培植成干细胞；三则是从自身抽取骨髓，然后加入各种诱导因子，在进行一些基因的改造和修饰，定向诱导分化成神经干细胞。
药物不具备激活脑神经细胞的功能是根本原因，所以要想从根本上治疗脑病等神经系统疾病，借助外界移植神经干细胞是唯一有效的方法。科学研究证明了神经干细胞的定向分化性，使修复和替代死亡的神经细胞成为现实。
生物干细胞移植提供了多种治疗途径，这些途径包括：介入途径、局部种植、静脉途径、腰穿途径、头部立体定向颅内干细胞移植以及CT引导下的脊髓内干细胞移植。这些方法大致可归为四大类： 直接注射：这是针对病变部位的直接治疗，通常在下肢腓肠肌走向的血管方向进行多点注射。
