转染后细胞数量太少可不可以进行二次转染
1、(1)一般会选择复苏细胞传代3-4次(汇合率达到90%之前对细胞进行传代，不要长到100%)，从解冻过程中恢复过来可以稳定生长的细胞进行细胞转染，传代次数高(30-40)时，细胞的生长速度和形态会改变。
2、PEI因为带正电荷，通常来说比较容易进细胞，但是毒性较大。通用的转染试剂是Lipofectamin2000，但是针对不同的细胞，转染试剂也不一样。至于细胞，看贴壁还是悬浮，通常说来，贴壁容易转。如果是悬浮的，建议你离心后再转染。
3、细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。jinghuanlv认为：悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
4、一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。
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病毒转染脂肪干细胞后需要换液和传代吗
1、继续培养3-4天。中间视细胞生长情况可传代或换液。
2、细胞处理后的第二天，在显微镜下观察细胞状态，如死细胞较多且细胞密度较低，需要进行换液操作。 （1）悬浮细胞请在高倍镜下观察，一般而言，活细胞轮廓圆润、界限清晰、透明度大、折光性强。
3、此时就需要对细胞进行换液。换液时吸掉旧培养液，用PBS 洗涤细胞一至二次，加入适量的新鲜培养基即可。细胞传代：随着培养时间的延长和细胞不断分裂，细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止。
4、观察培养基是否正常，细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。观察时拧紧盖子。加热PBS、versene、培养基，(提前做好) 瓶子不要倒着放，不要让液体接触到瓶塞。
请问哪里可以购买单克隆抗体杂交瘤细胞株？
克隆化的细胞可以在体外进行大量培养，收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限，其不能超过特定的细胞浓度，且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。
单克隆抗体的概念单克隆抗体，英文名为MonoclonalAntibody（mAb），是指由单一克隆B细胞株所产生的能够特异性结合单一抗原的抗体。与传统的多克隆抗体相比，单克隆抗体的优点在于其结构单一性和特异性强。
动物细胞培养就可以了。。网上看到个这个。。增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。
细胞培养及转染Protocol
细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术，起到了细胞保种作用。
操作步骤：将转染试剂与目标分子（如质粒DNA、siRNA等）混合，形成载体-目标分子复合物。将该复合物加入包含目标细胞的培养基中，使其与细胞发生相互作用，从而导入目标分子。
附着型胞(adherentcell)（1）吸掉旧培养液。（2）用D-PBS洗涤细胞一至二次。
lo2细胞转染效率
1、转染效率是转染时的成功率，表达量是蛋白质的量。当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。表达量是当某基因的长度较长时，匹配到该基因的reads数目也应该越多。
2、病毒感染细胞本来效率就较低，一定要注意以下几点：感染时的培养基尽量少些； 每1ml的培养基中加入5-10ul的Polybrene（储存液浓度为2mg/ml ），可以提高效率约3-5倍。
3、细胞状态：维持细胞生长及健康旺盛是提高转染效率的重要条件。建议选择对数生长期的细胞为佳，此时期的细胞生长旺盛，可能得到更高的转染效率，切勿选择传代次数过多，基因型可能发生改变的细胞。
4、不同细胞类型和转染试剂之间的适用性和效果可能会有所差异。因此，在进行细胞转染实验时，需根据具体实验目的、细胞类型和目标分子的特性选择合适的转染方法，并优化实验条件以提高转染效率和细胞存活率。
